Banca de QUALIFICAÇÃO: OTÁVIO AUGUSTO LEITÃO DOS SANTOS

Uma banca de QUALIFICAÇÃO de MESTRADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE : OTÁVIO AUGUSTO LEITÃO DOS SANTOS
DATA : 16/08/2019
HORA: 10:00
LOCAL: na sala 404, 4º andar, Bloco B, Campus SA da Fundação Universidade Federal do ABC, localizada na Avenida dos Estados, 5001, Santa Terezinha, Santo André, SP
TÍTULO:

Caracterização de uma monooxigenase lítica de polissacarídeos de inseto e estudos bioquímicos e biofísicos de uma feruloil-CoA sintetase de metagenômica

PÁGINAS: 57
RESUMO:

A biomassa lignocelulósica é amplamente encontrada na natureza. Ela é composta por três principais polímeros: a celulose, lignina e hemicelulose. Estes podem ser utilizados como matéria-prima em diversos processos industriais, como produção de etanol e bioplásticos. Todavia, os processos ainda não são economicamente viáveis. Dessa forma, o estudo de novas enzimas que atuem nesses substratos pode ser uma alternativa para reduzir os custos e otimizar os processos. Este projeto tem como objetivo estudar uma monooxigenases lítica de polissacarídeos (LPMO) de Coptotermes gestroi (cupim) e uma enzima feruloil-CoA sintetase (FCS) identificada de metagenômica do solo de uma plantação de cana-de-açúcar. A LPMO é uma nova classe de enzima identificada por atuar em diferentes polímeros, levando sua quebra por mecanismos oxidativos. A LPMO de cupim (CgLPMO) apresenta massa molecular teórica de 27,1 kDa e ponto isoelétrico de 6,26. A expressão foi testada utilizando os vetores pET22b(+) com tag de histidina em E. coli Origami B e BL21(DE3) pLysS e pET26b(+) com Stret-tag em em E. coli Rosetta 2(DE3) pLysS, porém somente esta última teve expressão bem-sucedida confirmada por espectrometria de massa. Outra enzima estudada, a feruloil-CoA sintetase (FCS) pode ser empregada na conversão da lignina em vanilina, um produto de alto valor agregado. A expressão da feruloil-CoA sintetase deste estudo (FCS3) foi realizada utilizando pET28b(+). Ela apresenta 64,9 kDa de massa molecular e ponto isoelétrico de 6. Utilizando espectroscopia de fluorescência para avaliar a estabilidade da FCS3 variando o pH, foi observado que ela mantem a conformação entre pH 5-10, perdendo estrutura em pH 3-4. Nas próximas etapas, ambas as enzimas serão testadas bioquimicamente variando o substrato e serão estudas biofisicamente por dicroísmo circular, espalhamento de luz dinâmico e espectroscopia de fluorescência intrínseca

MEMBROS DA BANCA:
Presidente - Interno ao Programa - 3053215 - LIVIA SENO FERREIRA CAMARGO
Membro Titular - Examinador(a) Externo ao Programa - 054.114.556-85 - ALINE DINIZ CABRAL - UNIFESP
Membro Titular - Examinador(a) Externo ao Programa - 1675714 - MARCIA APARECIDA SPERANCA
Membro Suplente - Examinador(a) Interno ao Programa - 1696841 - LUCIANO PUZER
Membro Suplente - Examinador(a) Interno ao Programa - 1544372 - HANA PAULA MASUDA