Substituição do soro fetal bovino (SFB) por plasma rico em plaquetas (PRP) em cultura de células-tronco mesenquimais, provenientes do cordão umbilical: uma proposta para biotecnologias como terapia celular e engenharia e tecidos
As células-tronco (CTs) são definidas por terem propriedades de proliferação e diferenciação, com capacidade de auto renovação celular. As células-tronco mesenquimais (CTMs) representam a população de CT mais estudadas, por demonstrarem capacidade em dar origem em cardiomiócitos, músculo esquelético, precursores neurais, entre outras células. Para o cultivo de CTMs em laboratório, utiliza-se meio de cultura suplementado com soro fetal bovino (SFB), apesar do uso extensivo em protocolos para expansão celular, o SFB apresenta riscos potenciais que não podem ser negligenciados e que são difíceis de eliminar do soro. Uma alternativa à utilização de SFB é a utilização de plasma rico em plaquetas (PRP), que contém alta concentração de fatores de crescimento (FC) auxiliando na expansão celular in vitro. O principal objetivo do estudo foi analisar a eficácia da substituição do SFB por PRP provenientes do sangue de cordão umbilical (SCU), para suplementação do meio de cultura celular para expansão de CTMs. Caracterizando a população celular, através de citometria de fluxo, avaliando o padrão de crescimento de CTMs frente ao SFB e PRP e comparando as principais características de CTM cultivadas com SFB e PRP, através da análise morfológica e citoquímica. Foram coletados tecidos de cordão umbilical e posteriormente realizado o processamento celular para extrair e expandir as CTMs, o PRP foi coletado do próprio sangue de cordão umbilical, obtivemos 3 amostras com diferentes concentrações sendo, PRP1 93.000 plaquetas/mm3, PRP2 190.000 plaquetas/mm3 e PRP3 136.000 plaquetas/mm3. As células obtidas a partir do meio suplementado com PRP, demonstraram morfologia celular alongada, aderência ao plástico e positivos para os marcadores CD44, CD73, CD90 e CD105, além de não demonstrarem alterações numéricas ou estruturais nos cromossomos analisados, demonstrando que o PRP provenientes do SCU pode estimular a proliferação das células mantendo as características de CTM, também se observou que as células cultivadas com PRP não promoveram alteração do padrão citoquímico em comparação ao SFB, portando não promovendo alterações no metabolismo celular citoquimicamente detectáveis. O PRP não alterou a viabilidade de forma importante em CTMs do cordão umbilical humano. O presente estudo evidenciou a eficácia da substituição do SFB, para suplementação de culturas de CTMs, por PRP autólogo derivados do SCU.