Análise morfológica e citoquímica de células Vero cultivadas em arcabouços densos, porosos e fibrosos de PCL, PHBV e sua blenda 75/25
A engenharia de tecidos proporciona uma alternativa clínica para pacientes com lesões no tecido ósseo, para isso utiliza-se de uma fonte de celular juntamente com um biomaterial compatível. Neste contexto, o presente trabalho pretende estudar a biocompatibilidade in vitro de células Vero, uma linhagem de célula fibroblásticas, sobre materiais poliméricos puros de poli(e-caprolactona) (PCL), poli(hidroxibutirato-co-hidroxivalerato) (PHBV) e sua blenda na proporção 75/25, nas formas densa, porosa e fibrosa. Os biomateriais foram caracterizados morfologicamente através de Microscopia Eletrônica de Varredura (MEV). Foram realizados ensaios com o MTT para análise de possível toxicidade por contato. As células Vero foram inoculadas sobre os biomateriais e cultivadas por 120 horas. Após esse tempo de cultivo, as células foram fixadas e submetidas a análise por microscopia eletrônica de varredura (MEV), além de análise morfológica e citoquímica. Os corantes usados foram Cristal Violeta (morfologia), Azul de Toluidina em pH 4,0 (para ácidos nucleicos e glicosaminoglicanos) e 2,5 (para glicosaminoglicanos apenas), reação do Ácido Periódico e Reativo de Schiff (PAS, para açúcares neutros), Xylidine Ponceau em pH 2,5 (para proteínas totais) e Picro-sirius/Hematoxilina (para análise seletiva de colágeno). Os biomateriais estudados não foram consideradas citotóxicas. As células foram capazes de se aderir, embora lentamente, e proliferar sobre os substratos. Os dados citoquímicos indicam que as células apresentam uma grande atividade funcional sobre os arcabouços, mas não acumulam açúcares ácidos ou neutros. Não evidenciamos a produção de fibras colágenas. Concluímos que os polímeros testados são bons para engenharia de tecidos.