IL-10 na competência e criotolerância de embriões bovinos produzidos in vitro
A mortalidade embrionária é uma das principais causas de perda econômica em sistemas de produção e pode estar associada a fatores envolvidos na atividade inflamatória e apoptose. Estudos indicam que a interleucina-10 (IL-10) ao se ligar ao seu receptor especifico induz a inibição da atividade do NF-κB reduzindo expressão de genes responsáveis pela produção de citocinas pró-inflamatórias, como por exemplo o fator de necrose tumoral (TNF-α). A IL-10 é uma citocina pleiotrópica que controla os processos inflamatórios suprimindo a produção de citocinas pró-inflamatórias que são transcricionalmente controladas pelo NF-κB. Em seu estado inativo o NF-κB está presente no citoplasma como um heterodímero p50-p65, ligado à sua proteína inibidora IkB. Citocinas pró-inflamatórias, como o TNF-α, ativam o NF-κB, estimulando a atividade de quinases IkB (IKKs) permitindo assim a liberação do NF-κB para o núcleo. O homodímero de IL-10 possuem um receptor tetraédrico do tipo II, composto por duas subunidades α e β. A subunidade α é expressa em células hematopoiéticas (como células T, B, NK, mastócitos e dendríticas) enquanto a subunidade β é expressa de um modo geral. Quando se liga ao seu receptor IL-10R-α e -ß, ativa a via de sinalização Jak1-Stat3. A ativação de Jak1, induz a ativação de Stat3. Ao ser ativado a Stat3 entra no núcleo inibindo a atividade de ligação ao DNA de NF-κB, e bloqueando a da atividade de IkB. O presente projeto tem como objetivo a investigação do efeito da IL-10 sobre a competência e criotolerância de embriões bovinos produzidos in vitro. Para tanto, o efeito da IL-10 será investigado sobre o desenvolvimento e qualidade embrionária in vitro e sobre reversão dos efeitos pró-inflamatórios induzidos pelo TNF-α. Adicionalmente, será avaliada a criotolerância de embriões suplementados com IL-10, antes e após a criopreservação, e os blastocistos obtidos serão interrogados quanto a viabilidade celular (apoptose celular e número de células totais e do trofectoderma) e abundância relativa de transcritos de genes inflamatórios. Para análise estatística, modelos univariados de dados serão utilizados, assumindo o nível de significância de 5%.