Banca de DEFESA: SANDRA VALÉRIA VASSILIADES

Uma banca de DEFESA de DOUTORADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE : SANDRA VALÉRIA VASSILIADES
DATA : 12/05/2020
HORA: 09:30
LOCAL: participação remota + https://zoom.us/j/92018111810?pwd=MitPRmNIRXExRWd6VnUxdzEyMExTZz09
TÍTULO:

Porfirinas monofuncionalizadas com L,L-difenilalanina para potencial aplicação em terapia fotodinâmica.

PÁGINAS: 55
RESUMO:

A terapia fotodinâmica tem como princípio a utilização de compostos orgânicos fotossensíveis
que ao serem irradiados pela luz, desencadeiam processos de oxidação celular. Desse modo, a
obtenção de compostos fotoativas capazes de promover morte em células tumorais é um alvo
potencial para o desenvolvimento de biomateriais inteligentes. Neste trabalho, foram
preparadas quatro porfirinas monofuncionalizadas com difenilalanina (FF) inéditas com
diferentes substituintes na posição meso, que foram avaliadas quanto a sua citotoxicidade por
meio ensaio de viabilidade celular, visando a aplicação na co-estruturação dos compostos
preparados com Fmoc-FF para formação de hidrogéis fotorresponsivos. Os compostos de
interesse (1-4) foram preparados com duas etapas principais, a ciclização do macroanel e a
funcionalização com o dipeptídeo, sendo as estruturas confirmadas por ressonância nuclear
magnética (RMN). Os espectros de UV/Vis e fluorescência, demonstraram que o perfil
fotofísico de 1-4 são compatíveis com a literatura. Um estudo de interação porfirina-
FF/membrana foi realizado utilizando lipossomos de DOPC (1,2-dioleoil-sn-glicero-3-
fosfocolina), preparados pelo método de extrusão. As membranas formadas foram tituladas
com lipossomo híbrido formado pela mistura 70:30 de DOPC e DOPE (1,2-dioleoil--3-
fosfatidiletanolamina), e observou-se que a interação dos lipossomos com as porfirinas
funcionalizadas foi mais estabilizada, quando comparadas a sua versão não funcionalizada. O
tempo de vida das porfirina-FF foi aumentado na presença das membranas. Os compostos
preparados não apresentaram citotoxicidade sem e com exposição a luz, e os resultados
obtidos indicam que as porfirinas-FF possuem potencial propriedade de proliferação celular,
que foi observada também por microscopia de fluorescência. Hidrogéis formados pela auto-
organização de Fmoc-FF e porfirina-FF (0,5%, 5%, 10%, 20% e 30%), foram preparados em uma
mistura H 2 O:DMSO (9,5:0,5) e caracterizadas por UV/Vis, fluorescência, reologia e microscopia
eletrônica de varredura (MEV). As propriedades fotofísicas de 1 e 2 permaneceram inalteradas
após a formação dos géis, o perfil reológico, também não apresentou mudanças com a adição
de porfirina-FF, mantendo as características de hidrogel. Nas imagens de MEV observou-se que
as fibras de Fmoc-FF são alongadas, e a adição de 1 e 2 causou a formação de ramificações nos
fios. Os hidrogéis foram utilizados como matriz de adesão celular para HEK293, e por
microscopia de fluorescência observou-se que as células ficaram aderidas, e exposição por 10
minutos com lâmpada LED azul, indicou a ocorrência de indução à proliferação celular. Os
compostos 1-4 foram obtidos em rendimento global médio de 3%, foram caracterizados por
RMN ( 1 H e 13 C) e espectroscopia de absorbância e emissão. O estudo da interação entre a
porfirina/membrana demonstrou que a adição da porção peptídica levou a maior estabilidade
e a presença do lipossomo aumentou o tempo de vida dos compostos. Não foi observada
citotoxicidade em 1-4 para células HEK293, e os resultados têm fortes indicativos indução à
proliferação celular. Os hidrogéis preparados a partir de 1 e 2 co-estruturados com Fmoc-FF
preservam as propriedades óticas das porfirinas, e o aumento da concentração dos compostos
não impediu a hidrogelação do dipeptídeo. A superfície rugosa do hidrogel não dificultou a
adesão celular, e com microscopia de fluorescência foi possível notar que após exposição
luminosa, ocorreu aumento no crescimento celular. Esses resultados promissores indicam a
viabilidade de uso desses biomateriais como curativos fotorresponsivos, por exemplo.
Em um trabalho complementar foram preparados hidrogéis de Fmoc-FF e tetraporfirinas que
foram por caracterizadas por UV/Vis, fluorescência, reologia, MEV e a ressonância
paramagnética eletrônica (RPE) foi utilizada para avaliar a formação de oxigênio singleto. A

tetrafenilporfirina (TFP), tetracarboxiporfirina (TCP), tetrahidroxiporfirina (THP) e
tetrapiridilporfirina (TPyP) foram obtidas como subproduto da reação de ciclização e
caracterizadas por 1 H-RMN. Os hidrogéis foram preparados com uma mistura solvente de
H2O:DMSO (9:1). Os hidrogéis preparados tiveram suas características fotofísicas preservadas
e a adição das tetraporfirinas não alterou as propriedades reológicas, nem a morfologia do
hidrogel. Foi possível observar a formação de 1 O 2 para os compostos TFP, TCP e THP (alta
concentração). E estudo comparativo com as tetraporfirinas em gel e solução, demonstraram
que o confinamento dos compostos causa uma modulação na formação de 1O2.

MEMBROS DA BANCA:
Presidente - Interno ao Programa - 1544341 - WENDEL ANDRADE ALVES
Membro Titular - Examinador(a) Interno ao Programa - 1939561 - FERNANDO HEERING BARTOLONI
Membro Titular - Examinador(a) Externo ao Programa - 1604147 - LEONARDO JOSE STEIL
Membro Titular - Examinador(a) Externo ao Programa - 1672728 - ANA CAROLINA SANTOS DE SOUZA GALVAO
Membro Titular - Examinador(a) Externo à Instituição - ALESSANDRO RODRIGUES - UNIFESP
Membro Suplente - Examinador(a) Interno ao Programa - 1544365 - GISELLE CERCHIARO
Membro Suplente - Examinador(a) Externo ao Programa - 1676364 - JULIANA MARCHI
Membro Suplente - Examinador(a) Externo à Instituição - DANIEL PEREZ VIEIRA - IPEN