SENSORES ELETROQUÍMICOS BASEADOS EM PEPTÍDEOS BIOMIMÉTICOS
Um imunossensor eletroquímico alternativo e label-free para a detecção rápida de Leishmania braziliensis foi desenvolvido imobilizando uma sonda baseada em peptídeos do antígeno de superfície promastigote (PSA-38S) em nanofibras eletrospun poliamida-6 (PA6) / quitosana. Um aumento no teor de quitosana na solução de fiação leva a uma diminuição no diâmetro das fibras formadas, enquanto os dados de calorimetria de varredura diferencial (DSC) e difração de raios X (DRX) mostraram uma diminuição na cristalinidade ao aumentar o teor de quitosana no formulação. Além disso, a incorporação de quitosana nas nanofibras PA6 tende a diminuir a resistência ao processo de transferência de carga na superfície do eletrodo. Foi utilizado um conteúdo de 40% em peso de quitosana para imobilização do antígeno peptídico, caracterizado por microscopia eletrônica de varredura (MEV) e espectroscopia de impedância eletroquímica (EIS). A detecção foi realizada medindo-se a mudança relativa na impedância antes e após a reação anti-Leishmania braziliensis pelo EIS. Sob condições otimizadas, a mudança relativa na impedância foi proporcional ao valor logarítmico das concentrações de PSA na faixa de 2,5 a 10 pg ML-1 (r 2 = 0,9946) com um limite de detecção de 0,2 pg ML-1, que foi ligeiramente inferior ao do ensaio imunossorvente ELISA). Além disso, o sensor foi testado contra dois anticorpos inespecíficos (T. cruzi e beta-actina), enquanto a análise multivariada usando reconhecimento não supervisionado de padrões por meio da análise de componentes principais foi aplicada com sucesso à identificação do padrão em relação a cada anticorpo. Finalmente, o imunoensaio eletroquímico otimizado pode ser uma abordagem favorável para os testes de detecção de Leishmania, pois é capaz de diferenciar amostras de soro humano de leishmaniose visceral negativa e positiva.