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GABRIELA MUELLER DE MELO
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Generalização do aprendizado temporal entre modalidades sensoriais e tarefas
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Orientador : ANDRE MASCIOLI CRAVO
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Data: 14/02/2020
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A natureza das nossas percepções e interações com o mundo é inerentemente associada à passagem do tempo. Mecanismos altamente refinados para o processamento temporal permitem a discriminação e o aprendizado de padrões e intervalos de tempo em diferentes escalas de complexidade. Entretanto, mesmo os princípios mais fundamentais desses mecanismos ainda são amplamente desconhecidos. Um ponto central consiste em determinar em que medida eles podem ser melhor descritos por modelos dedicados de sistemas neurais especializados, por modelos intrínsecos de sistemas distribuídos pelo córtex cerebral, ou ainda por modelos híbridos intermediários. As propriedades de generalização do aprendizado temporal oferecem uma oportunidade particularmente interessante para a investigação empírica dessas questões. Assim sendo, é proposta a realização de experimentos comportamentais com os seguintes objetivos: 1. Investigar a generalização do aprendizado temporal na modalidade auditiva para a modalidade visual. 2. Comparar os efeitos de generalização do aprendizado para intervalos de durações curtas e durações longas.Os resultados a serem obtidos através dessas abordagens proporcionarão um entendimento mais preciso sobre os principais mecanismos responsáveis pelo processamento temporal.
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A natureza das nossas percepções e interações com o mundo é inerentemente associada à passagem do tempo. Mecanismos altamente refinados para o processamento temporal permitem a discriminação e o aprendizado de padrões e intervalos de tempo em diferentes escalas de complexidade. Entretanto, mesmo os princípios mais fundamentais desses mecanismos ainda são amplamente desconhecidos. Um ponto central consiste em determinar em que medida eles podem ser melhor descritos por modelos dedicados de sistemas neurais especializados, por modelos intrínsecos de sistemas distribuídos pelo córtex cerebral, ou ainda por modelos híbridos intermediários. As propriedades de generalização do aprendizado temporal oferecem uma oportunidade particularmente interessante para a investigação empírica dessas questões. Assim sendo, é proposta a realização de experimentos comportamentais com os seguintes objetivos: 1. Investigar a generalização do aprendizado temporal na modalidade auditiva para a modalidade visual. 2. Comparar os efeitos de generalização do aprendizado para intervalos de durações curtas e durações longas.Os resultados a serem obtidos através dessas abordagens proporcionarão um entendimento mais preciso sobre os principais mecanismos responsáveis pelo processamento temporal.
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MARILIA INES MOVIO
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Expressão funcional de AGO2: estudo da 'proteína-chave' do complexo RISC
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Orientador : ALEXANDRE HIROAKI KIHARA
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Data: 07/04/2020
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MicroRNAs (miRNAs) são pequenos RNAs não-codificantes que controlam a produção de proteína em nível pós-transcricional. A ação dos miRNAs depende de uma maquinaria bem orquestrada que inclui diversos elementos. Levando isso em conta, é de particular interesse o papel da Argonauta-2 (AGO2), uma proteína essencial no complexo de silenciamento induzido por RNA (RISC). Portanto, o principal objetivo desse presente trabalho é caracterizar a função de AGO2 no desenvolvimento retiniano. Ratos Long Evans em idade pós-natal (P0) e adulto (P60) foram provenientes do biotério da UFABC, mantidos em ciclo claro/escuro (12:12). Animais foram eutanasiados usando uretana intraperitoneal (25%) e posterior decaptação. As retinas foram isoladas para descrever AGO2 na retina em desenvolvimento e madura usando i) PCR em tempo real (n=6), ii) western blotting (WB, n=5) e imunofluorescência (IF, n=6). Foi empregado análises de Manders e Spearman (n=6) para colocalização AGO2-núcleo. Para induzir knockdown de AGO2, oligômero morpholino (MO) o seu oligo controle (Ctl) foram injetados no espaço subretiniano em P0, e retinas foram isoladas após 7 dias para WB (n=8), IF (n=6) e colocaração de hematoxilina-eosina (HE, n=6). Todos os procedimentos foram aprovados pelo Comitê de Ética em Uso de Animais da UFABC (16/2014 e 1102011018) e os resultados foram medidos usando estatística descritiva e comparados por teste-t pareado. PCR e WB demonstraram que ambos níveis proteicos e gênicos de AGO2 são menos em P0 (PCR: 2^-1=0.5-fold expression; P<0.05; WB: P0: 0.57±0.07 vs P60: 1.18±0.09 densidade óptica normalizada, P<0.01). IF e quantificação proteica fracionada demonstraram nenhuma mudança de AGO2 no citosol, enquanto em animais adultos AGO2 acumula no núcleo (P0: 15.63±1.77 vs P60: 23.95±2.32, P<0.05). Quando as células AGO2+ foram analisadas, os resultados demonstraram que a localização de AGO2 depende no estado de diferenciação celular. Em P0, analises de Spearman demonstraram menor quantidade de AGO2 nuclear em células imaturas comparando com as maduras (-0.04±0.22 vs0.25±0.18, p<0.05), enquanto o coeficiente de Manders demonstraram nenhuma alteração no AGO2 nuclear em células ganglionares diferenciadas. O tratamento com MO causou uma redução de cerca de 52% do nível proteico de AGO2, que induziu diversas alterações na retina, como a redução da espessura da camada nuclear interna (Ctl:17.37±1.25 vs MO:13.69±1.38, P<0.05), aumento das células bipolares PKCα+ (Ctl: 14.83 ± 1.39 vs MO: 18.58 ± 0.67, P<0.01), células amácrinas CR+ (Ctl: 4.58 ± 1.56 vs MO: 11.17 ± 2.19, P<0.05), e diminuição das células amácrinas ChAT+ (Ctl: 5.50 ± 0.58 vs MO: 6.00 ± 0.71, P<0.05). Levando tudo em consideração, nosso trabalho revela que AGO2 transloca para o núcleo durante o desenvolvimento retiniano, e sua presença é essencial para a formação coordenada das camadas retinianas e diferenciação de subtipos celulares específicos.
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MicroRNAs (miRNAs) são pequenos RNAs não-codificantes que controlam a produção de proteína em nível pós-transcricional. A ação dos miRNAs depende de uma maquinaria bem orquestrada que inclui diversos elementos. Levando isso em conta, é de particular interesse o papel da Argonauta-2 (AGO2), uma proteína essencial no complexo de silenciamento induzido por RNA (RISC). Portanto, o principal objetivo desse presente trabalho é caracterizar a função de AGO2 no desenvolvimento retiniano. Ratos Long Evans em idade pós-natal (P0) e adulto (P60) foram provenientes do biotério da UFABC, mantidos em ciclo claro/escuro (12:12). Animais foram eutanasiados usando uretana intraperitoneal (25%) e posterior decaptação. As retinas foram isoladas para descrever AGO2 na retina em desenvolvimento e madura usando i) PCR em tempo real (n=6), ii) western blotting (WB, n=5) e imunofluorescência (IF, n=6). Foi empregado análises de Manders e Spearman (n=6) para colocalização AGO2-núcleo. Para induzir knockdown de AGO2, oligômero morpholino (MO) o seu oligo controle (Ctl) foram injetados no espaço subretiniano em P0, e retinas foram isoladas após 7 dias para WB (n=8), IF (n=6) e colocaração de hematoxilina-eosina (HE, n=6). Todos os procedimentos foram aprovados pelo Comitê de Ética em Uso de Animais da UFABC (16/2014 e 1102011018) e os resultados foram medidos usando estatística descritiva e comparados por teste-t pareado. PCR e WB demonstraram que ambos níveis proteicos e gênicos de AGO2 são menos em P0 (PCR: 2^-1=0.5-fold expression; P<0.05; WB: P0: 0.57±0.07 vs P60: 1.18±0.09 densidade óptica normalizada, P<0.01). IF e quantificação proteica fracionada demonstraram nenhuma mudança de AGO2 no citosol, enquanto em animais adultos AGO2 acumula no núcleo (P0: 15.63±1.77 vs P60: 23.95±2.32, P<0.05). Quando as células AGO2+ foram analisadas, os resultados demonstraram que a localização de AGO2 depende no estado de diferenciação celular. Em P0, analises de Spearman demonstraram menor quantidade de AGO2 nuclear em células imaturas comparando com as maduras (-0.04±0.22 vs0.25±0.18, p<0.05), enquanto o coeficiente de Manders demonstraram nenhuma alteração no AGO2 nuclear em células ganglionares diferenciadas. O tratamento com MO causou uma redução de cerca de 52% do nível proteico de AGO2, que induziu diversas alterações na retina, como a redução da espessura da camada nuclear interna (Ctl:17.37±1.25 vs MO:13.69±1.38, P<0.05), aumento das células bipolares PKCα+ (Ctl: 14.83 ± 1.39 vs MO: 18.58 ± 0.67, P<0.01), células amácrinas CR+ (Ctl: 4.58 ± 1.56 vs MO: 11.17 ± 2.19, P<0.05), e diminuição das células amácrinas ChAT+ (Ctl: 5.50 ± 0.58 vs MO: 6.00 ± 0.71, P<0.05). Levando tudo em consideração, nosso trabalho revela que AGO2 transloca para o núcleo durante o desenvolvimento retiniano, e sua presença é essencial para a formação coordenada das camadas retinianas e diferenciação de subtipos celulares específicos.
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JULIANA HELENA BRUNO MACHADO
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Mapeamento eletrofisiológico da modulação de verbos por características lexico-semânticas.
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Orientador : MARIA TERESA CARTHERY GOULART
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Data: 02/04/2020
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Entender como processamos e recuperamos o significado do que ouvimos ou lemos é fundamental para o entendimento da linguagem. Entretanto, até o momento, a grande maioria dos estudos que investigam estes processos focam no processamento de substantivos. Estes estudos têm mostrado que níveis de processamento proposto como pré-lexical, lexical e semântico ocorrem em cascata com certa sobreposição entre eles. No entanto, as dimensões dos verbos que podem afetar seu processamento ainda são amplamente desconhecidas. O presente projeto visa verificar: (1) Quais são as variáveis psicolinguísticas que influenciam o reconhecimento visual de verbos e (2) Se há um processamento em cascata ou paralelo destas variáveis. Foram desenvolvidas duas tarefas: Decisão Lexical e Categorização Semântica. Foram selecionados 300 verbos e para a tarefa de Decisão Lexical foram criados 300 pseudoverbos. Esse estudo contou com a participação de 32 voluntários entre 18 e 30 anos, universitários e destros, divididos nas 2 tarefas. Realizaram a tarefa de decisão lexical 20 voluntários e os outros 12 participaram do experimento de categorização semântica. Por meio dos dois experimentos com registro concomitante de EEG, pretendemos analisar como estas diferentes variáveis modulam o processamento neural dos verbos. Esse estudo pode contribuir para estudos posteriores de patologias léxico-semânticas e motoras.
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Entender como processamos e recuperamos o significado do que ouvimos ou lemos é fundamental para o entendimento da linguagem. Entretanto, até o momento, a grande maioria dos estudos que investigam estes processos focam no processamento de substantivos. Estes estudos têm mostrado que níveis de processamento proposto como pré-lexical, lexical e semântico ocorrem em cascata com certa sobreposição entre eles. No entanto, as dimensões dos verbos que podem afetar seu processamento ainda são amplamente desconhecidas. O presente projeto visa verificar: (1) Quais são as variáveis psicolinguísticas que influenciam o reconhecimento visual de verbos e (2) Se há um processamento em cascata ou paralelo destas variáveis. Foram desenvolvidas duas tarefas: Decisão Lexical e Categorização Semântica. Foram selecionados 300 verbos e para a tarefa de Decisão Lexical foram criados 300 pseudoverbos. Esse estudo contou com a participação de 32 voluntários entre 18 e 30 anos, universitários e destros, divididos nas 2 tarefas. Realizaram a tarefa de decisão lexical 20 voluntários e os outros 12 participaram do experimento de categorização semântica. Por meio dos dois experimentos com registro concomitante de EEG, pretendemos analisar como estas diferentes variáveis modulam o processamento neural dos verbos. Esse estudo pode contribuir para estudos posteriores de patologias léxico-semânticas e motoras.
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