Banca de QUALIFICAÇÃO: DANIELA CRISTINA SERDAN
Uma banca de QUALIFICAÇÃO de MESTRADO foi cadastrada pelo programa.DISCENTE : DANIELA CRISTINA SERDAN
DATA : 13/05/2024
HORA: 10:00
LOCAL: Online
TÍTULO:
DESENVOLVIMENTO DE UM DISPOSITIVO MICROFLUÍDICO PARA O PREPARO DE AMOSTRAS PARA CRIOMICROSCOPIA ELETRÔNICA RESOLVIDA NO TEMPO
PÁGINAS: 54
RESUMO:
A criomicroscopia eletrônica de partículas isoladas (Cryo-EM) visa produzir estruturas de complexos biológicos em resolução quase atômica utilizando imagens adquiridas no microscópio eletrônico de transmissão. Recentemente, esta metodologia vem permitindo o estudo de reações envolvendo macromoléculas biológicas, na escala de milissegundos. A técnica de criomicroscopia eletrônica resolvida no tempo, como é chamada, é capaz de revelar a estrutura de estados intermediários em reações envolvendo complexos macromoleculares. Este trabalhoconsistiu na montagem de dispositivo microfluídico, no qual duas soluções são injetadas através de canais diferentes, passando por um canal mistura de tamanho definido, o que permite que a reação ocorra por um curto período. Após a reação, a mistura é pulverizada na grade de nanofios “auto secante” usando nitrogênio. A grade contendo a mistura é imediatamente congelada em etano líquido e depois armazenada em nitrogênio líquido. Foram projetadosdispositivos microfluídicosinspirados em sistemas já disponíveis na literatura e outros,introduzindo modificações na geometria do canal de mistura. Os dispositivos de mistura consistem em uma camada de PDMS (polidimetilsiloxano), fixada a uma lâmina de vidro de suporte. Inicialmente foram avaliados parâmetros básicos como tempo de mistura, pressão do gás e condições do gelo.Os resultados mostraram que a mistura ocorre corretamente e há formação de gelo amorfo na grade. Dispositivos de mistura com geometria helicoidal foram implementados visando melhorar a turbulência e sua capacidade de mistura.A distribuição das gotículas na grade e a qualidade do gelo foram validadas através da coleta e processamento dos dados de apoferritina.
MEMBROS DA BANCA:
Presidente - Interno ao Programa - 1601025 - MARCELLA PECORA MILAZZOTTO
Membro Titular - Examinador(a) Interno ao Programa - 1763495 - WANIUS JOSE GARCIA DA SILVA
Membro Titular - Examinador(a) Externo à Instituição - LEONARDO TALACHIA ROSA - UNICAMP
Membro Suplente - Examinador(a) Interno ao Programa - 1912347 - NATHALIA DE SETTA COSTA
Membro Suplente - Examinador(a) Externo à Instituição - ANDRE LUIS BERTELI AMBROSIO - USP