Banca de QUALIFICAÇÃO: BEATRIZ CINTRA MORENA

Uma banca de QUALIFICAÇÃO de MESTRADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE : BEATRIZ CINTRA MORENA
DATA : 18/03/2020
HORA: 14:00
LOCAL: sala S24, Térreo, Bloco Delta, Campus SBC da Fundação Universidade Federal do ABC, localizada na Alameda da Universidade, s/n, Bairro Anchieta - São Bernardo do Campo, SP.
TÍTULO:

PAPEL FUNCIONAL DE MyD88 NO PROCESSO NEUROINFLAMATÓRIO E RECUPERAÇÃO LOCOMOTORA APÓS LESÃO MEDULAR 

PÁGINAS: 64
RESUMO:

A lesão medular (LM) é uma condição clínica de alta importância que pode ser desencadeada por um insulto traumático (mecânico) ou não traumático, levando à interrupção da comunicação entre o sistema nervoso central e músculos e órgãos localizados em segmentos medulares localizados abaixo do sítio de lesão. A LM traumática pode ser dividida em duas fases: i) as consequências imediatas do trauma mecânico e ii) a ativação da resposta inflamatória. A neuroinflamação após LM geralmente é mediada pela ativação da família de receptores do tipo Toll (Toll-like Receptors, TLR), localizados principalmente na microglia. Os TLRs são ativados por padrões moleculares associados a patógenos (PAMPs) ou padrões moleculares associados a danos (DAMPs) específicos, ativando diretamente a via de sinalização intracelular dependente de MyD88. MyD88 é uma proteína adaptadora citosólica que medeia a transdução de sinal iniciada pela maioria dos TLRs e culmina na expressão do fator nuclear NF-κB, levando à produção de mediadores inflamatórios que prejudicam a regeneração tecidual. No entanto, o papel da via MyD88 na recuperação após LM ainda é pouco conhecido. Considerando isso, nosso objetivo foi estudar o papel funcional de MyD88 na neuroinflamação, regeneração tecidual, fenótipo microglial e recuperação da função motora após LM. Para isso, combinamos análises de imunofluorescência (IF), western blotting (WB) e ensaios de morte celular. Os resultados foram comparados por medidas repetidas ANOVA de duas vias, seguidas de teste posthoc apropriado. Todos os procedimentos foram conduzidos de acordo com a CEUA (2169280119). Os níveis proteicos de MyD88 não se alteraram 24 horas após o LM (sham: 17.860,96 ± 2.013,71; WT: 16.636,25 ± 3.011,98). Ensaios de IF usando IBA1 mostraram que os camundongos MyD88 KO têm menos células microgliais do que os animais do tipo selvagem (wild type – WT) 24h após LM (WT: 26,43 ± 1,85; MyD88 KO: 15,33 ± 0,77; P <0,001). Por sua vez, a análise de skeleton revelou que os camundongos MyD88 KO tiveram aumento do comprimento das ramificações (WT: 2,36 ± 0,49; MyD88 KO: 5,84 ± 0,63; P <0,001) e maior número de ramificações (WT: 21,89 ± 3,23; MyD88 KO: 44,25 ± 3,10; P < 0,01) do que os camundongos controle 24h após LM, apresentando morfologia ramificada. Além disso, o ensaio de IF mostrou que os camundongos MyD88 KO têm menos células CD86 positivas na substância branca do que os controles 24 horas após o LM (WT: 23,77 ± 3,70; MyD88 KO: 14,16 ± 2,20; P <0,05). Também foi possível verificar que a diferença de células positivas para TUNEL nos controles e MyD88 KO 24h após LM não é estatisticamente significativa (WT: 111,03 ± 2,67; MyD88 KO: 89,91 ± 3,86), embora haja uma tendência a diminuição. Finalmente, observamos que os camundongos MyD88 KO apresentam menos células positivas para GS (WT: 51,83 ± 7,62; MyD88 KO: 9,25 ± 2,64; P <0,001) quando comparados aos camundongos controle 24h após a LM, como evidenciado por ensaio de IF. Todos esses dados sugerem que o MyD88 pode modular a ativação e proliferação da microglia, bem como a comunicação entre microglia e astrócitos, e na resposta imunológica inata, controlando a expressão de CD86. Consequentemente, é possível que a modulação do ambiente citotóxico seja capaz de melhorar a recuperação motora e a regeneração tecidual após a LM.

MEMBROS DA BANCA:
Presidente - Interno ao Programa - 2353139 - ELOAH RABELLO SUAREZ
Membro Titular - Examinador(a) Externo ao Programa - 1872537 - MARCELA BERMUDEZ ECHEVERRY
Membro Titular - Examinador(a) Externo ao Programa - 3066269 - VINICIUS DE ANDRADE OLIVEIRA
Membro Suplente - Examinador(a) Externo ao Programa - 1994696 - SILVIA HONDA TAKADA