Banca de QUALIFICAÇÃO: LETÍCIA SILVA FERRAZ

Uma banca de QUALIFICAÇÃO de DOUTORADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE : LETÍCIA SILVA FERRAZ
DATA : 01/07/2019
HORA: 14:00
LOCAL: Campus Santo André
TÍTULO:

ALTERAÇÕES DE MORFOLOGIA E DINÂMICA MITOCONDRIAIS NO MELANOMA: COMPREENSÃO DA BIOLOGIA TUMORAL E PROSPECÇÃO DE NOVOS ALVOS TERAPÊUTICOS

PÁGINAS: 111
RESUMO:

O melanoma é uma doença proliferativa maligna originada em melanócitos, caracterizada por alta atividade metastática e mortalidade. Esta doença é caracterizada pela mutação BRAF em 40-50% dos casos e pela mutação NRAS em 15-20% dos casos. O vemurafenibe é um inibidor da via das MAPK que prolonga a sobrevivência de pacientes com melanoma metastático não operável ou mutação BRAF^V600E. Estudos recentes sugeriram a mitocôndria como alvo de ação do vemurafenibe, no entanto, os mecanismos subjacentes não são claros. Mitocôndrias são organelas altamente dinâmicas que constantemente se fundem e se dividem o que ajuda a rede mitocondrial a adaptar-se às alterações nas necessidades metabólicas das células. GTPases relacionadas à dinamina (mitofusina-1, mitofusina-2 e OPA1) são necessárias para fusão mitocondrial, enquanto que DRP1 é necessária por fissão. O objetivo principal deste estudo foi caracterizar as alterações na dinâmica mitocondrial em linhagens celulares de melanoma tratado com vemurafenibe com as mutações BRAF^V600E (SKmel19) e NRAS^Q6IR (SKmel147). Para tanto, foram realizadas análises da viabilidade celular (teste de redução do MTT, exclusão de azul de Trypan e dupla marcação com anexina V-FITC/iodeto de propídio); da expressão de proteínas envolvidas nas vias (western blotting); de parâmetros relativos à função mitocondrial (produção de ATP e potencial de membrana); e da morfologia mitocondrial (microscopia eletrônica de transmissão e de fluorescência). O vemurafenibe induziu uma morte celular dependente da concentração e tempo no SKmel19, mas não nas células SKmel147. Nossas análises mostraram que a inibição da via das MAPK pelo vemurafenibe na linhagem SKmel19 promoveu a inibição da fosforilação de DRP1 com manutenção do potencial de membrana mitocondrial e da produção de ATP. Encontramos também alterações na expressão de proteínas envolvidas no processo de fusão mitocondrial (Mfn1, Mfn2, OPA-1) na linhagem SKmel19. Nossos dados mostram, em ambas as linhagens alterações no padrão de organização mitocondrial, anteriormente fragmentado para hiperfusionado, com a formação de amplas redes mitocondriais. A fusão mitocondrial induzida pelo vemurafenibe em células de melanoma e o impacto dessa alteração na energia mitocondrial e no destino celular estão sob investigação. Estes dados evidenciam o processo de fusão mitocondrial como um possível alvo terapêutico para o tratamento do melanoma.

MEMBROS DA BANCA:
Presidente - Interno ao Programa - 1674592 - TIAGO RODRIGUES
Membro Titular - Examinador(a) Interno ao Programa - 1948411 - LUIZ ROBERTO NUNES
Membro Titular - Examinador(a) Interno ao Programa - 1623562 - RODRIGO LUIZ OLIVEIRA RODRIGUES CUNHA
Membro Suplente - Examinador(a) Externo ao Programa - 1771857 - CARLOS ALBERTO DA SILVA