Banca de QUALIFICAÇÃO: EVERTON DE SOUZA NENCIONI

Uma banca de QUALIFICAÇÃO de MESTRADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE : EVERTON DE SOUZA NENCIONI
DATA : 23/03/2023
HORA: 14:00
LOCAL: Remota
TÍTULO:

INIBIDOR DE PROTEASES TIPO KUNITZ: MBmTISINT - CLONAGEM, EXPRESSÃO, PURIFICAÇÃO E CARACTERIZAÇÃO BIOQUÍMICA

PÁGINAS: 44
RESUMO:

 

Os inibidores de proteases têm sido estudados como uma estratégia terapêutica promissora para uma ampla gama de doenças. As proteases têm atividade pró-inflamatória e são frequentemente associadas a lesões teciduais. O MBmTIsint é um inibidor do tipo Kunitz-BPTI, que consiste em um domínio inibitório com 57 aminoácidos e uma massa molecular de 6,5 kDa. Ele é uma versão modificada do BmTIsint, que é uma quimera sintética de dois inibidores nativos encontrados no carrapato Rhipicephalus microplus.
Este trabalho visou à clonagem do gene correspondente ao MBmTIsint e à sua expressão em vetor pET26B. Após a indução da expressão, o produto da expressão foi purificado por cromatografia de afinidade em coluna de níquel, seguida de cromatograia de gel-filtração em coluna Sephadex G-75, o processo de purificaçãoi foi acompanhado por SDS-PAGE. A proteína teve aumento no grau de homogeneidade da amostra ao longo do processo de purificação. Em seguida, foram realizados testes de inibição enzimática com a tripsina pancreática bovina. Os resultados mostraram que o MBmTIsint apresentou Ki na escala de nM o que evidencia seu potencial inibitório sobre esta enzima. Outras atividades inibitórias serão testadas no decorrer do projeto.

MEMBROS DA BANCA:
Presidente - Interno ao Programa - 2605490 - SERGIO DAISHI SASAKI
Membro Titular - Examinador(a) Interno ao Programa - 1696841 - LUCIANO PUZER
Membro Titular - Examinador(a) Externo à Instituição - GRAZIELE CRISTINA FERREIRA
Membro Suplente - Examinador(a) Interno ao Programa - 2605420 - MARIA CRISTINA CARLAN DA SILVA