Banca de QUALIFICAÇÃO: ANA CAROLINA RIBEIRO OLIVEIRA E SILVA

Uma banca de QUALIFICAÇÃO de MESTRADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE : ANA CAROLINA RIBEIRO OLIVEIRA E SILVA
DATA : 20/06/2022
HORA: 09:00
LOCAL: Campus Santo André
TÍTULO:

ESTUDO DO PAPEL DA ENZIMA CYP3A13, MEMBRO DA SUPERFAMÍLIA DE CITOCROMO P450, NO DESENVOLVIMENTO DA DOENÇA HEPÁTICA GORDUROSA NÃO ALCOÓLICA (DHGNA)

PÁGINAS: 52
RESUMO:

A doença hepática gordurosa não alcoólica (DHGNA) é considerada a manifestação hepática da síndrome metabólica e vem atingindo índices alarmantes, sendo considerada o distúrbio hepático mais comum do planeta. Caracterizada pela esteatose hepática (EH), a DHGNA em seu primeiro estágio é benigna e reversível. Entretanto, por ser assintomática, a mesma pode avançar para quadros inflamatórios graves como esteato hepatite, cirrose e hepatocarcinoma, o que leva ao comprometimento das funções vitais do fígado. A DHGNA é uma doença multifatorial, sendo associada a resistência à insulina, diabetes mellitus tipo 2 (DM2), obesidade, dislipidemia e microbiota intestinal. No presente estudo, construímos uma ferramenta lentiviral controlada pelo promotor induzível Tight a fim de investigar o papel da enzima CYP3A13, membro da superfamília de citocromo p450 (CYP450), em células da linhagem AML-12 previamente expressando o sistema TET3G, sob condições de esteatose. Objetivo: Analisar o possível papel da CYP3A13, no desenvolvimento de EH e suas alterações metabólicas, através de super expressão por sistema induzível TetOn, em hepatócitos da linhagem AML-12. Métodos: Foi construída uma ferramenta lentiviral controlada pelo promotor induzível Tight carregando o marcador molecular GFP e expressando o gene murino CYP3A13, sob estímulo de doxiciclina. Células AML-12 previamente expressando a proteína 3G do sistema TetOn receberam o pLENTI Tight CYP3A13 IRES eGFP por ensaio de lipofectamina, e, foram selecionadas por 11 dias com geneticina e blasticidina. Ensaios mimetizando a dislipidemia foram realizados. Alterações na expressão gênica foram analisadas por RT-qPCR e as células coradas com Oil Red O (ORO) para verificar o acúmulo de triglicerídeos neutros. Resultados: Pode-se avaliar o acúmulo lipídico através de reesterificação de ácidos graxos por coloração com ORO. A superexpressão da enzima CYP3A13 não possui efeito no metabolismo do oleato. Conclusão: A ferramenta construída é funcional para estudos envolvendo a enzima CYP3A13, entretanto outras vias metabólicas carecem investigação.

MEMBROS DA BANCA:
Presidente - Interno ao Programa - 1227329 - CESAR AUGUSTO JOAO RIBEIRO
Membro Titular - Examinador(a) Interno ao Programa - 1672728 - ANA CAROLINA SANTOS DE SOUZA GALVAO
Membro Titular - Examinador(a) Externo à Instituição - MONICA MARQUES TELLES - UNIFESP
Membro Suplente - Examinador(a) Interno ao Programa - 1674592 - TIAGO RODRIGUES
Membro Suplente - Examinador(a) Externo à Instituição - ANAYSA PAOLA BOLIN - USP