Banca de QUALIFICAÇÃO: LARISSA AKASHI

Uma banca de QUALIFICAÇÃO de MESTRADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE : LARISSA AKASHI
DATA : 03/12/2021
HORA: 14:00
LOCAL: por participação remota
TÍTULO:

APLICAÇÃO DE ÓXIDO DE GRAFENO EM MÉTODOS ALTERNATIVOS DE EXTRAÇÃO DO RNA DO VÍRUS DA RAIVA

PÁGINAS: 51
RESUMO:

A raiva é uma doença causada pelo vírus da raiva (RABV - Rabies Lyssavirus) do gênero Lyssavirus, família Rhabdoviridae. Com longa história de infecção e grande dano à humanidade, a raiva apresenta como principais medidas de controle a vacinação, a educação em saúde e a vigilância epidemiológica. O diagnóstico laboratorial seguido da identificação das variantes antigênicas ou linhagens genéticas é uma importante ferramenta para auxiliar na vigilância epidemiológica a fim da rápida e adequada implantação das demais medidas de controle. Neste sentido, as técnicas de biologia molecular, principalmente a  extração de RNA e a Transcrição Reversa seguida pela reação em Cadeia pela Polimerase (RT-PCR) têm sido fundamentais para melhor compreensão sobre a história da raiva. Tanto a etapa de extração de RNA como a RT-PCR  dependem de diversos reagentes com custo elevado. Assim, a busca por métodos alternativos de extração de RNA mais eficientes e econômicos são essenciais para causar impacto direto no fortalecimento da vigilância e controle da raiva. Os protocolos mais usuais para a extração do RNA utilizam o reagente Trizol e mais recentemente esferas magnéticas. A nanociência é uma ferramenta importante que estuda materiais de carbono como os óxidos de grafeno (GO), interessantes devido aos níveis de oxigênio incorporados para potenciais aplicações de biotecnologias. A fim de aumentar a eficiência dos métodos de extração, o objetivo deste trabalho foi incorporar o GO em diferentes métodos para extração de RNA. Os GO foram sintetizados pelo método Hummers Modificated, caracterizados por espectroscopia UV-Vis e foram incorporados em duas metodologias de extração de RNA: Método com o reagente Trizol e Método com beads magnéticas. Para extração foi utilizada a amostra padrão de vírus da raiva (RABV) Pasteur Virus  (PV). A eficiência do GO foi medida pela quantificação por espectrofotometria de RNA obtido a partir dos diferentes protocolos. Posteriormente à extração de RNA, foi realizada RT-PCR para determinar a viabilidade do RNA extraído para utilização desta técnica. Foi possível observar que a incorporação do GO no método com reagente Trizol não foi favorável para o sucesso da extração de RNA do PV. Entretanto, o método com beads magnéticas combinados com o GO possibilitou a extração em concentrações maiores, aumentando a eficiência do método comprovada pela RT-PCR com resultado positivo para todos RNAs extraídos. Os avanços proporcionados por este estudo contribuem para

MEMBROS DA BANCA:
Presidente - Interno ao Programa - 927.634.300-82 - HELENA BEATRIZ DE CARVALHO RUTHNER BATISTA - UFRGS
Membro Titular - Examinador(a) Interno ao Programa - 2605490 - SERGIO DAISHI SASAKI
Membro Titular - Examinador(a) Interno ao Programa - 2605420 - MARIA CRISTINA CARLAN DA SILVA
Membro Suplente - Examinador(a) Interno ao Programa - 1640114 - MARCELA SORELLI CARNEIRO RAMOS
Membro Suplente - Examinador(a) Externo ao Programa - 1761120 - DANILO JUSTINO CARASTAN