Banca de DEFESA: JAINE GONÇALVES GARCIA

Uma banca de DEFESA de MESTRADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE : JAINE GONÇALVES GARCIA
DATA : 02/09/2020
HORA: 14:00
LOCAL: por participação remota
TÍTULO:

Caracterização in vitro de diferentes linhagens genéticas do vírus da raiva isoladas de morcegos não hematófagos

PÁGINAS: 60
RESUMO:

A raiva é uma das mais antigas doenças que se tem registro causada pelo vírus da raiva (RABV), essa zoonose tem distribuição mundial e ainda causa a morte de aproximadamente 60.000 pessoas por ano. O RABV é um vírus com genoma de RNA pertencente à família Rhabdoviridae, gênero Lyssavirus, e apesar dos avanços nas pesquisas sobre este vírus, ainda existem lacunas sobre a manutenção deste na natureza. Aspectos relacionados à biologia do RABV e seus mecanismos de adaptação aos hospedeiros são importantes lacunas que precisam ser preenchidas. Nos últimos anos, a detecção do RABV em diferentes espécies de morcegos tem sido destaque na Saúde Pública. A possibilidade desses animais desenvolverem hábitos sinantrópicos, considerando que são reservatórios para o RABV, pode causar maior risco de infecções humanas. Este trabalho teve como objetivo elucidar aspectos sobre a adaptação e manutenção do RABV em diferentes espécies de morcegos não hematófagos. Foram selecionadas 9 amostras de RABV isoladas de diferentes espécies de morcegos não hematófagos. Inicialmente tais amostras de RABV foram submetidas à caracterização genética, através da extração de RNA, transcrição reversa seguida pela reação em cadeia da polimerase (RT-PCR) tendo como alvo a nucleoproteína, sequenciamento genético e análise filogenética. As espécies de morcegos foram identificadas geneticamente através da extração de DNA, PCR tendo como alvo o citocromo oxidase I (COI) do DNA mitocondrial (DNAmt) e posterior sequenciamento e análise filogenética. Após seleção e caracterização, as amostras foram submetidas à inoculação intracerebral em camundongos albinos suíços e posteriormente adaptadas ao crescimento in vitro em células de rim embrionário humano (HEK 293T). Cada passagem em série nas células foi submetida ao teste de Imunofluorescência Direta (IFD). Foram identificadas as seguintes linhagens genéticas do RABV: linhagem genética de morcego frugívoro Artibeus lituratus (3 amostras), linhagem genética de morcego insetívoro Eptesicus furinalis (3 amostras) e linhagem genética de morcego insetívoro Tadarida brasiliensis (3 amostras). Com a identificação genética das espécies, foi possível identificar que cada linhagem genética de RABV foi mantida pela respectiva espécie de morcego. Foram realizadas 10 passagens sucessivas das amostras descritas em células HEK 293T, até o momento, uma das amostras de RABV com linhagem genética de morcego frugívoro Artibeus lituratus (IP1233/16) e uma das amostras de RABV com linhagem genética de morcego insetívoro Eptesicus furinalis (IP964/06) estão adaptadas ao crescimento in vitro. Com os resultados obtidos até o momento, considerando as amostras analisadas, podemos concluir que não foram verificados casos de spillover interespécies para transmissão do RABV. Ao final da adaptação in vitro das amostras, estas serão submetidas a ensaios de cinética de replicação viral. Com este trabalho, será possível propor ferramentas de diagnóstico e vigilância para controlar a raiva específica em morcegos não hematófagos.

MEMBROS DA BANCA:
Presidente - Interno ao Programa - 927.634.300-82 - HELENA BEATRIZ DE CARVALHO RUTHNER BATISTA - UFRGS
Membro Titular - Examinador(a) Interno ao Programa - 2605490 - SERGIO DAISHI SASAKI
Membro Titular - Examinador(a) Externo à Instituição - KARIN CORRÊA SCHEFFER FERREIRA
Membro Suplente - Examinador(a) Interno ao Programa - 2605420 - MARIA CRISTINA CARLAN DA SILVA
Membro Suplente - Examinador(a) Externo à Instituição - WILLIAN DE OLIVEIRA FAHL