Banca de QUALIFICAÇÃO: DNANE VIEIRA ALMEIDA

Uma banca de QUALIFICAÇÃO de DOUTORADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE : DNANE VIEIRA ALMEIDA
DATA : 23/07/2025
HORA: 09:00
LOCAL: Defesa remota (on-line)
TÍTULO:

Caracterização estrutural e bioquímica de uma nova dienolactona hidrolase bacteriana termoestável ativa em ésteres de tereftalato

PÁGINAS: 135
RESUMO:

As dienolactona hidrolases (DLHs) são enzimas que desempenham um papel crucial na quebra de ésteres de dienolactonas por meio da adição de uma molécula de água. As DLHs compartilham estruturas terciárias notavelmente semelhantes e um arranjo conservado de resíduos catalíticos. Essas enzimas possuem um potencial significativo em aplicações biotecnológicas devido à sua capacidade de degradar compostos aromáticos complexos em produtos mais simples e menos tóxicos. Esta Tese de Doutorado apresenta a estrutura cristalográfica e a caracterização bioquímica de uma nova DLH da bactéria hipertermofílica Hydrogenobacter thermophilus (HtDLH). A estrutura cristalográfica da HtDLH, resolvida a uma resolução de aproximadamente 1,67 Å, exibe um enovelamento canônico do tipo α/β-hidrolase formado por oito fitas β no núcleo, uma α-hélice enterrada e outras seis expostas ao solvente. A estrutura também confirmou a tríade catalítica conservada em DHLs e constituída pelos resíduos de aminoácidos Cys121, Asp170 e His202. A estrutura da HtDLH foi comparada com a PETase de Ideonella sakaiensis e outras DLHs. Nossos resultados também mostraram que a HtDLH forma homodímeros estáveis em solução. Estudos funcionais mostraram que a HtDLH possui a atividade esterase esperada sobre ésteres com cadeias curtas de carbono, como o acetato de p-nitrofenila, atingindo atividade ótima em pH 7,5 e 70 °C. Além disso, a HtDLH mantém mais de 50% de sua atividade ótima mesmo após incubação a 90 °C por 16 h. Curiosamente, a HtDLH exibe atividade catalítica sobre monômeros de PET, incluindo bis-1,2-hidroxietil tereftalato (BHET) e 1-(2-hidroxietil) 4-metil tereftalato (HMT), bem como outros ésteres alifáticos e aromáticos. Esses resultados, associados à ausência de atividade em PET amorfo, indicam que a HtDLH possui características de uma enzima degradadora de BHET (“BHET-degrading enzyme”). Os estudos apresentados nesta Tese podem contribuir com novos conhecimentos para a área de reciclagem de plásticos por meio da engenharia de proteínas, possibilitando o desenvolvimento de soluções inovadoras com aplicações relevantes nos contextos biotecnológico e ambiental.

MEMBROS DA BANCA:
Presidente - Interno ao Programa - 3053215 - LIVIA SENO FERREIRA CAMARGO
Membro Titular - Examinador(a) Interno ao Programa - 3292611 - MILCA RACHEL DA COSTA RIBEIRO LINS
Membro Titular - Examinador(a) Externo ao Programa - 1675714 - MARCIA APARECIDA SPERANCA
Membro Suplente - Examinador(a) Interno ao Programa - 3298754 - TALES ALEXANDRE DA COSTA E SILVA
Membro Suplente - Examinador(a) Externo ao Programa - 2605490 - SERGIO DAISHI SASAKI