Banca de QUALIFICAÇÃO: DANIELLY CARMAGNANI NUNES

Uma banca de QUALIFICAÇÃO de MESTRADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE : DANIELLY CARMAGNANI NUNES
DATA : 01/08/2025
HORA: 14:00
LOCAL: https://conferenciaweb.rnp.br/sala/fabio-30493
TÍTULO:

SELEÇÃO E CARACTERIZAÇÃO DE APTÂMEROS ESPECÍFICOS CONTRA TROPONINA CARDÍACA NITRADA

PÁGINAS: 50
RESUMO:

As doenças cardiovasculares representam a principal causa de morte global, sendo responsáveis por cerca de 80% dos óbitos em países de baixa e média renda. A Síndrome Coronariana Aguda (SCA) destaca-se como uma das manifestações mais graves, exercendo grande impacto sobre os sistemas de saúde pública e contribuindo significativamente para os índices de mortalidade no Brasil. A SCA é caracterizada por isquemia miocárdica aguda, decorrente da obstrução parcial ou total das artérias coronárias, o que compromete o suprimento de oxigênio ao tecido cardíaco, podendo ou não evoluir para necrose celular. Embora biomarcadores como a troponina cardíaca sejam eficazes no diagnóstico de necrose miocárdica, ainda existe uma lacuna na detecção de eventos isquêmicos anteriores à morte celular. Diante disso, surge a necessidade de explorar novos alvos que possibilitem a identificação prévia da isquemia. Nesse contexto, a troponina cardíaca nitrada emerge como um potencial marcador precoce, por refletir alterações fisiopatológicas relacionadas ao estresse oxidativo, sem necessariamente indicar necrose tecidual. Com base nisso, o presente trabalho teve como objetivo selecionar e caracterizar aptâmeros de DNA com alta afinidade e especificidade contra peptídeos sintéticos derivados da troponina I cardíaca modificados por nitração, visando a criação de novas ferramentas para diagnóstico precoce de isquemia miocárdica. Para isso, foram analisados resíduos de tirosina suscetíveis à nitração na troponina I, com base em bancos de dados e modelos estruturais. A partir dessas análises, duas sequências foram selecionadas e peptídeos foram sintetizados e caracterizados quanto às suas propriedades físico-químicas. Em seguida, os peptídeos foram conjugados a suportes sólidos de beads magnéticas para a etapa de seleção de aptâmeros. A seleção foi realizada por meio da técnica Systematic Evolution of Ligands by Exponential Enrichment (SELEX), utilizando uma biblioteca de oligonucleotídeos contendo regiões randomizadas. Foram conduzidas rodadas de seleção positiva com os peptídeos nitrados, seguidas por rodadas negativas com peptídeos não modificados e beads isoladas, a fim de garantir a especificidade das sequências selecionadas. A amplificação dos aptâmeros foi realizada por polymerase chain reaction (PCR) e visualizada por eletroforese em gel de agarose. Ao todo, foram realizadas dez rodadas de seleção para uma das sequências e nove para a outra. Os resultados indicaram um enriquecimento progressivo das bibliotecas ao longo das rodadas e sucesso na amplificação dos produtos esperados, sugerindo a seleção de aptâmeros com potencial afinidade pelas regiões nitradas da troponina. A seleção e caracterização inicial de aptâmeros contra a troponina cardíaca nitrada demonstrou-se viável e promissora. No entanto, etapas subsequentes de sequenciamento, análise estrutural e testes funcionais ainda são necessárias para validar a especificidade e a aplicabilidade desses aptâmeros em ferramentas diagnósticas voltadas à detecção precoce da isquemia miocárdica.

MEMBROS DA BANCA:
Presidente - Interno ao Programa - 287.258.508-73 - FABIO MITSUO LIMA - UNIFESP
Membro Titular - Examinador(a) Interno ao Programa - 2605490 - SERGIO DAISHI SASAKI
Membro Titular - Examinador(a) Externo à Instituição - Vinícius Bassaneze
Membro Suplente - Examinador(a) Externo à Instituição - LUCIANA DE ANDRADE LUZ COSTA - UNIAN-SP